БиоФарма
 
V04С Х
Прочие диагностические средства
Українською мовою   English Контакты

Диагностикум лептоспирозный эритроцитарный антигенный поливалентный жидкий для РНГА

Тест-набор

Общая характеристикa
овные свойства: Диагностикум лептоспирозный представляет собой жидкий препарат, после встряхивания образует однородную суспензию коричневого цвета, а после отстаивания происходит расслоение на прозрачную жидкость и осадок темно-коричневого цвета.

Состав
действующие вещества: 2% суспензия формалинизированных эритроцитов, сенсибилизированных поливалентным антигеном лептоспир (использованы штаммы лептоспир серогрупп Icterohaemorragiae, Grippotyphosa, Pomona, Canicola, Haebdomadis).
вспомогательные вещества: 1 % раствор нейтрального формалина - консервант

Комплектность. Форма выпуска
Диагностикум лептоспирозный по 10 мл во флаконах, по 3, 5, 10 флаконов в пачке.
Сыворотка кроличья иммунная лептоспирозная родоспецифическая лиофилизированная в ампулах с 1 мл, по 1 ампуле в пачке.
Суспензия формалинизированных эритроцитов объемной концентрацией 50 % во флаконах по 5 мл, или 10 мл по 1 флакону в пачке.
Сыворотка нормальная кроличья во флаконах по 5 мл, или 10 мл, по 1 флакону в пачке.
Один флакон диагностикума рассчитан в среднем на 100 анализов.

Назначение
Полуколичественное определение в реакции непрямой гемаглютинации (РНГА) специфических лептоспирозных антител в сыворотке крови людей, грызунов и других животных.

Способ использования
При использовании диагностикума лептоспирозного эритроцитарного антигенного поливалентного жидкого для РНГА материалом исследования служит кровь людей, грызунов и других животных.
Все операции с образцами человеческого и животного происхождения следует проводить соответственно установленным правилам надлежащей лабораторной практики, используя для работы одноразовые резиновые перчатки.
Все материалы следует утилизировать в соответствии с требованиями соответствующих руководящих и нормативных документов.
Подготовка к проведению испытания
Забор и подготовка образцов
Кровь отбирают и получают сыворотку в соответствии с принятыми медицинскими методиками. Плазму не используют. При необходимости проводят исследования образцов трупной крови.
Образцы хранят не более 7 суток при температуре (5±3) °С. Допускается замораживание образцов до минус 18 °С и ниже. Образцы могут быть повторно заморожены и разморожены не более двух раз.
После размораживания и перед исследованием образец тщательно перемешивают, при необходимости удаляют преципитат центрифугированием при 3000 об/мин на протяжении 10 минут.
Приготовление раствора-стабилизатора
К 100 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют 0,4 мл нормальной кроличьей сыворотки и 2,7 мл 40% формалина.
Приготовление рабочего раствора иммунной лептоспирозной сыворотки
Лиофилизованую массу растворяют в 1 мл дистиллированной воды на протяжении 3-5 минут. К 0,1 мл раскрытой сыворотки добавляют 4,9 мл 0,9% раствора натрия хлорида: получают рабочий раствор в разведении 1:50.
Приготовление рабочего раствора кроличьей нормальной сыворотки
Сыворотку разводят 0,9% раствором натрия хлорида 1:10 (0,1 мл сыворотки и 0,9 мл 0,9% натрия хлорида).
Приготовление исследуемых сывороток
Исследуемые сыворотки разводят 0,9 % раствором натрия хлорида 1:10 (0,1 мл сыворотки и 0,9 мл 0,9% натрия хлорида) и адсорбируют 50% суспензией формалинизированных эритроцитов, которую перед использованием встряхивают до образования однородной смеси из расчета 0,1 мл эритроцитов на 1 мл исследуемой сыворотки. Смесь выдерживают на протяжении 20 минут в термостате при температуре 37 °С или (20±2) часов при температуре (5±3) °С для предотвращения неспецифичной агглютинации эритроцитов в контролях исследуемых сывороток. После центрифугированиея при 3000 об./мин. надосадочную жидкость исследуют в РНГА.
Приготовление 2% и 1% суспензий формалинизированных эритроцитов
Для приготовления 2% суспензии формалинизированных эритроцитов для контроля исследуемых сывороток при постановке РНГА макрометодом 50% эритроциты разводят в 25 раз, для чего к 4,8 мл раствора-стабилизатора добавляют 0,2 мл 50% эритроцитов.
Для приготовления 1% суспензии формалинизированных эритроцитов для контроля исследуемых сывороток при постановке РНГА микрометодом 50% эритроциты разводят в 50 раз, для чего до 4,9 мл раствора-стабилизатора добавляют 0,1 мл 50% эритроцитов.
Первая постановка РНГА каждой серии диагностикума должна сопровождаться контролем диагностикума на специфичность и чувствительность.
Постановка РНГА
Проведение испытания
РНГА возможно выполнять в двух модификациях: макрометодом или микрометодом. Для постановки РНГА макрометодом используют 2% диагностикум и полистироловые пластины с лунками вместимостью 2 мл.
Для постановки РНГА микрометодом используют 1% диагностикум и пластины с лунками вместимостью 0,2 мл. Для этого 2% диагностикум разводят в 2 раза 0,9% раствором натрия хлорида.
Макрометод
В 6-12 лунок вносят по 0,5 мл раствора-стабилизатора. В первую и последнюю лунки добавляют по 0,5 мл исследуемой сыворотки в разведении 1:10 и переносят (титруют) по 0,5 мл в следующие лунки, кроме последней, которая служит контролем сыворотки. Из предпоследней лунки удаляют лишние 0,5 мл. Затем во все лунки, кроме последней, добавляют по 0,1 мл 2% лептоспирозного диагностикума, а в последнюю лунку добавляют 0,1 мл 2% формалинизированных несенсибилизированных эритроцитов барана. Для контроля диагностикума в лунку вносят 0,5 мл раствора-стабилизатора и добавляют 0,1 мл диагностикума. Пошатывая пластину, гомогенизируют содержимое лунок, и оставляют на 2 часа при комнатной температуре, после чего регистрируют результат.
Микрометод
В 8 лунок 3-х рядов микропластины вносят по 2 капли (0,05 мл) раствора-стабилизатора. Затем в первые и последние лунки вносят по 0,05 мл исследуемой сыворотки и титруют, кроме последней, которая служат контролем сыворотки. Во все лунки, кроме последней, добавляют 1 каплю (0,025 мл) 1% диагностикума лептоспирозного, а в последнюю лунку - 0,025 мл несенсибилизированных 1% формалинизированных эритроцитов барана. Для контроля диагностикума в лунку вносят 0,05 мл раствора-стабилизатора и 0,025 мл диагностикума. Микропластины слегка встряхивают и оставляют на 2 часа при комнатной температуре, после чего регистрируют результат.
Учет результатов
Результат считается положительным, если эритроциты выпадают на дно лунок равномерным пластом, занимая не меньшее 2/3 сферической поверхности.
При отрицательном результате эритроциты выпадают на дно лунок в виде "пуговицы" или узкого кольца с ровным краем.
Диагностикум должен выявлять антитела к лептоспир в РНГА в сыворотке больных в титре не менее, чем 1: 160 (диагностический титр).
Контроль чувствительности диагностикума
Проведение испытания
В 9-12 лунок полистиролового планшета вносят по 0,5 мл раствора-стабилизатора. В первую и последнюю лунки добавляют по 0,5 мл кроличьей иммунной лептоспирозной сыворотки в разведении 1:50 и переносят (титруют) по 0,5 мл в следующие лунки, кроме последней, которая служит контролем сыворотки. Из предпоследней лунки удаляют лишние 0,5 мл. Потом во все лунки, кроме последней, добавляют по 0,1 мл 2% лептоспирозного диагностикума, а в последнюю лунку добавляют 0,1 мл 2% формалинизированных несенсибилизированных эритроцитов барана. Пошатывая пластину, гомогенизируют содержимое лунок и оставляют на 2 часа при комнатной температуре.
Учет результатов
Диагностикум должен реагировать с иммунной родоспецифической сывороткой в разведении не ниже 1:3200.
Контроль специфичности диагностикума
Проведение испытания
В 3 лунки полистиролового планшета добавляют по 0,5 мл раствора-стабилизатора. В 1-ую и 2-ую лунки вносят по 0,5 мл нормальной кроличьей сыворотки в разведении 1:10. После перемешивания из них удаляют лишние 0,5 мл. Потом в 3 лунки добавляют по 0,1 мл диагностикума.
Учет результатов
Диагностикум должен давать отрицательный результат с нормальной кроличьей сывороткой.

Условия и срок хранения
Препарат хранят в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2°С до 8 °С. Срок годности 1 год.

Упаковка
Диагностикум лептоспирозный эритроцитарный антигенный поливалентный жидкий для РНГА по 10 мл во флаконе, по 3, или 5, или 10 флаконов в пачке; 50 % суспензия формалинизированных эритроцитов по 5 мл или 10 мл во флаконах, по 1 флакону в пачке; сыворотка кроличья нормальная по 5 мл или 10 мл во флаконах, по 1 флакону в пачке; сыворотка кроличья иммунная лептоспирозная родоспецифическая лиофилизированная с 1 мл в ампуле, по 1ампуле в пачке.

«« вернуться

Copyright © 2003
Сделано в LND
Апорт Top 1000 META - украинская поисковая система УКРМЕД - Каталог Медичних Сайтiв в Українi